禽肾炎病毒与鸡细小病毒双重PCR检测方法的建立

• 作者: 刘加波 张民秀 张艳芳 曾婷婷 罗思思 范晴 谢丽基 谢志勤 谢芝勋 邓显文 黄娇玲
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 禽肾炎病毒 鸡细小病毒 多重PCR 特异性 敏感性
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 58-62
• 页数: 5页
• 分类号: S851.3
• 字数: 3298字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2019.12.013

摘要

为了同时检测禽肾炎病毒(avian nephritis virus,ANV)和鸡细小病毒(chicken parvovirus,ChPV),根据GenBank中ANV的ORF基因和ChPV的NS1基因的保守序列,设计筛选了扩增片段大小分别为511 bp和242 bp的特异性引物,通过反应条件优化、特异性和敏感性试验,建立了一种双重PCR检测方法.该方法最佳引物比例为ANV上下引物各0.4μL(20 mol/L),ChPV上下引物各0.6μL(20 mol/L);最佳退火温度为53.8℃;灵敏度可达到55 fg(ANV)和58 fg(ChPV);对常见鸡病病原体进行检测,结果全为阴性.本研究建立的PCR方法具有特异、敏感、快速、稳定的优点,可用于同时鉴别诊断ANV和ChPV的混合感染.