siRNA干扰HSP90α表达对人肝癌HepG2细胞影响的研究

• 作者: 尹强兵 王晓捷 邹飞 陈雪梅 马晓姣
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: HSP90 RNA干扰 HepG2细胞
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 肝与肝病
• 页码范围: 443-446
• 分类号: R735.7
• 字数: 3108字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/J.ISSN.1007-6611.2011.06.001

摘要

目的 用RNA干扰方法建立稳定的热休克蛋白90α(HSP90α)抑制表达细胞株,研究热休克蛋白90α抑制表达对人肝癌HepG2细胞生物学行为的影响.方法 将人HSP90α RNA干扰基因片段连接入pSilencer 2.1-U6 neo载体,重组质粒pSilencerHSP90经亚克隆、纯化、测序鉴定后,用电穿孔法转染到人肝癌细胞系HepG2细胞内.经G418筛选后,阳性克隆被进一步分离培养,形成稳定的HSP90α抑制表达细胞株.将此细胞株作为siRNA干扰组,将未转染的HepG2细胞作为对照组.用荧光定量PCR,免疫印迹检测siRNA对HSP90α的抑制效果,采用CCK-8法测定其对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测其对细胞周期的影响.结果 测序表明HSP90α干扰序列完全正确;siRNA干扰组HSP90α mRNA水平降低,蛋白表达量也有明显的减少;与对照组相比,siRNA干扰组在48 h后可明显抑制细胞增殖,流式细胞术检测siRNA干扰组细胞有明显的G2/M期细胞周期阻滞.结论 建立稳定低表达HSP90α的HepG2细胞株;下调HepG2细胞内HSP90α的基因表达可抑制细胞增殖,引起明显的细胞周期阻滞.HSP90α靶向siRNA干扰为肝癌的基因治疗提供了可能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹飞	南方医科大学公共卫生与热带医学院职业卫生与职业医学系	110	556	13.0	18.0
2	陈雪梅	南方医科大学公共卫生与热带医学院职业卫生与职业医学系	23	92	5.0	8.0
3	马晓姣	南方医科大学公共卫生与热带医学院职业卫生与职业医学系	3	8	2.0	2.0
4	王晓捷	南方医科大学公共卫生与热带医学院职业卫生与职业医学系	2	7	2.0	2.0
5	尹强兵	南方医科大学公共卫生与热带医学院职业卫生与职业医学系	2	7	2.0	2.0