摘要:
目的:体外实验评价pENW对血管内皮细胞氧化应激损伤和炎性损伤的保护作用,并对其作用机制进行探讨,以提供pENW可开发成为抗血栓药物的依据.方法:原代堵养的血管内皮细胞以消化合并刮取法取自牛胸主动脉.H<,2>O<,2>(800μmol·L<'-1>) 和LPS(1 mg·L<'-1>) 分别用于模拟氧化应激损伤和炎性损伤,经典的Griess Reagent法用于检测一氧化氮的含量.LPS(100μg·L<'-1>) 用于刺激血管内皮细胞分泌一氧化氮.在考察pENW对血管内皮细胞的保护作用时,设空白对照组(给予等体积的磷酸盐缓冲溶液) 、模型组(分别给予H<,2>O<,2>(800μmol·L<'-1>) 或LPS 1 mg·L<'-1>进行造模) 、阳性药给药组(在H2O<,2>造模前给予依达拉奉10<'-5>mol·L<'-1>或在LPS造模前给予阿司匹林10<'-4>mol·L<'-1>) 和不同剂量pENW给药组(造模前分别给予pENW 10<'-4>,10<'-5>,10<'-6>和10<'-7>mol·L<'-1>).在探讨病理条件下pENW对血管内皮细胞释放一氧化氮的调节作用时,设空白对照组(给予等体积的磷酸盐缓冲溶液) 、模型组(给予LPS 100 μg·L<'-1>) 、阳性对照组(造模前给予阿司匹林10<'-4>mol·L<'-1>) 和不同剂量pENW给药组(造模前分别给予pENW 10<'-4>,10<'-5>,10<'-6>和10<'-7>mol·L<'-1>),而在进行正常生理条件下pENW调节血管内皮细胞一氧化氮释放作用的研究时,除不设模型组外,其余各组亦不给LPS.结果:pENW能剂量依赖性地减轻H<,2>O<,2>和LPS引起的血管内皮细胞损伤.在pENW10<'-4>mol·L<'-1>+H<,2>O<,2>和pENW 10<'-4>mol·L<'-1>+LPS组,细胞存活率分别升高至(97.6±40.4) %和(64.7±8.0) %;10<'-4>mol·L<'-1>的pENW使血管内皮细胞在正常生理条件下合成的一氧化氮由空白组的(15.50±2.82) 升高至(48.68±10.81) μmol·L<'-1>(P<0.01) ;但pENW能抑制LPS(100 μg·L<'-1>) 引起的一氧化氮大量升高,且抑制作用呈剂量依赖性.结论:pENW对血管内皮细胞损伤具有保护作用,其作用与调节内皮细胞一氧化氮的释放有关.