siRNA沉默RhoC表达诱导人肝癌BEL7402细胞凋亡

• 作者: 吕国悦 朱明光 王广义 谢淑丽
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RhoC基因 siRNA 肝肿瘤 凋亡
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 290-295
• 分类号: R735.7|R730.54
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2011.03.010

摘要

目的:研究siRNA沉默RhoC基因表达对人肝癌细胞BEL7402凋亡的影响及其机制,为肝癌的基因治疗提供实验依据.方法:构建RhoC-siRNA真核表达载体pU6mRFP RhoC-siRNA,转染BEL7402细胞,激光共聚焦显微镜检测转染效率,RT-PCR和Western blotting鉴定RhoC基因沉默效果;流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳和瑞氏染色检测BEL7402细胞凋亡,RT-PCR检测细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达.结果:成功构建pU6mRFP RhoC-siRNA重组载体,转染BEL7402细胞的效率为70%,RT-PCR和Western blotting检测RhoC基因沉默效率分别为85%和82%.pU6mRFP RhoC-siRNA转染组BEL7402细胞凋亡显著高于未转染BEL7402细胞和pU6mRFP Scramble-siRNA转染组BEL7402细胞[(21.00±2.23)%vs(6.47±1.64)%、(4.63±0.47)%,P＜0.01)],pU6mRFP RhoC-siRNA转染组BEL7402细胞DNA呈典型的"梯状"条带,瑞氏染色见转染组BEL7402细胞中有大量凋亡细胞.pU6mRFP RhoC-siRNA转染组BEL7402细胞Bcl-2基因水平显著低于、而Bax基因水平显著高于未转染BEL7402细胞和pU6mRFP Scramble-siRNA转染组BEL7402细胞(0.28±0.15 vs 0.96±0.21,1.03±0.24,P＜0.05:1.09±0.21 vs 0.26±0.10,0.25±0.07,P＜0.01).结论:siRNA沉默RhoC基因可诱导人肝癌BEL7402细胞凋亡,其机制与下调Bcl-2基因、上调Bax基因表达有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王广义	吉林大学第一医院肝胆胰外科	338	1618	17.0	26.0
2	吕国悦	吉林大学第一医院肝胆胰外科	102	594	11.0	20.0
3	朱明光	吉林大学白求恩医学院免疫学教研室	9	46	5.0	6.0
4	谢淑丽	吉林大学第一医院肝胆胰外科	23	67	4.0	6.0