沉默DNA-PKcs对肝癌耐药细胞Bel7402/5-Fu凋亡的影响

• 作者: 余春波 刘喜平 朱欣婷 李大玉 李长福 范芳
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 肝肿瘤 药物耐受性 DNA依赖性蛋白激酶催化亚基 肝癌耐药细胞 细胞凋亡 机制
• 年，卷（期）: 2018,（24）
• 所属期刊栏目: 论著·基础研究
• 页码范围: 3134-3137,3141
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 字数: 3384字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2018.24.003

摘要

目的 研究DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)基因沉默后对肝癌耐药细胞Bel7402/5-Fu细胞凋亡的影响.方法 实验分为空白对照组、脂质体对照组、NC对照组、siDNA-PKcs实验组.采用噻唑蓝(MTT)法检测耐药细胞Bel7402/5-Fu的耐药性;采用阳离子脂质体法将siDNA-PKcs寡核苷酸片段转染Bel7402/5-Fu细胞;Real-time PCR和Western blot分别检测细胞DNA-PKcs mRNA及蛋白的表达情况;倒置荧光显微镜下观察细胞形态变化(Hoechst33342染色法);流式细胞术检测细胞凋亡情况(AnnexinV/PI双染法);Western blot检测B细胞淋巴瘤-2相关x蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-x基因长片段(Bcl-xl)蛋白的表达情况.结果 MTT检测Bel7402/5-Fu细胞的半抑制浓度(IC50)明显增高,耐药细胞Bel7402/5-Fu的耐药指旨数为13.13;DNA-PKcs的mRNA与蛋白表达水平明显减少,设计的siDNA-PKcs特异序列能有效沉默细胞DNA-PKcs的表达;Hoechst-33342染色检测结果显示siDNA-PKcs实验组细胞体积缩小、细胞核边集、呈亮蓝色;流式细胞术检测结果显示,siDNA-PKcs实验组细胞凋亡率比其余组增加(P＜0.01);Western blot检测结果显示siDNA-PKcs实验组Bax蛋白表达水平比其余组高,Bcl-xl蛋白表达水平比其余组低(P＜0.01).结论 siDNA-PKcs能诱导肝癌耐药细胞Bel7402/5-Fu细胞凋亡,并能上调促凋亡蛋白Bax的蛋白表达水平,抑制抗凋亡蛋白Bcl-xl的蛋白表达水平.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范芳	遵义医学院生化教研室	50	126	6.0	7.0
2	朱欣婷	遵义医学院生化教研室	27	150	8.0	11.0
3	李长福	遵义医学院生化教研室	42	102	6.0	7.0
4	李大玉	遵义医学院生化教研室	17	34	3.0	4.0
5	余春波	遵义医学院生化教研室	8	10	2.0	3.0
6	刘喜平	遵义医学院生化教研室	8	17	3.0	3.0