大鼠前列腺特异膜抗原基因重组腺病毒诱导小鼠特异性抗体的研究

• 作者: 张冬梅 杨莉 王绍军
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 前列腺癌 前列腺特异膜抗原 腺病毒载体 同源异种免疫
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 147-151
• 分类号: R6
• 语种: 中文

摘要

目的 构建含大鼠前列腺特异膜抗原基因(PSMA)的重组腺病毒Ad-rPSMA,并研究其在小鼠体内的特异性体液免疫反应.方法 提取大鼠脑组织总RNA,经RT-PCR扩增PSMA基因片段,利用Adeasy腺病毒载体系统构建pAd-rPSMA重组腺病毒质粒,包装复制缺陷型重组腺病毒Ad-rPSMA,制备病毒颗粒.用制备的病毒感染HeLa细胞,Western blot检测PSMA基因的表达.以Ad-rPSMA重组腺病毒免疫C57小鼠,检测血清中PSMA特异性抗体.结果 成功构建了含有大鼠PSMA基因的重组腺病毒,制备的病毒颗粒数为1.97×1012VP/mL,A260/A280值为1.32,病毒滴度为5×1010IU/mL;Western blot检测可见大鼠PSMA基因在HeLa细胞中的表达;ELISA法检测出免疫小鼠血清中存在PSMA特异性抗体.结论 成功构建了大鼠前列腺特异膜抗原基因重组腺病毒Ad-rPSMA,并诱导小鼠产生了针对PSMA的特异性抗体.