肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的表达及其活性检测

• 作者: 孙丽霞 武国栋 王庆民 王晶翼 薛彤彤 赵雪娜 黄山英
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: TRAIL 可溶形式表达 活性检测 抑制率
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 16-19
• 分类号: Q786
• 字数: 2929字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2011.04.090

摘要

目的:构建肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)高表达工程菌株,以获得具有生物学活性的重组TRAIL蛋白.方法:合成TRAIL基因,转到大肠杆菌中,IPTG诱导获得成功表达；进一步优化,增加可溶形式的蛋白质.利用硫酸铵对发酵液进行沉淀,经Ni柱、阴离子和阳离子交换柱层析,最终获得蛋白质纯品,对其进行体外活性检测.结果:经过IPTG诱导后,TRAIL达到菌体总蛋白的30％；经过优化,可溶形式蛋白达到55％.纯化获得纯度高于95％的TRAIL样品,体外测活结果表明:TRAIL蛋白能有效抑制多种肿瘤细胞增殖,抑制率达到70％-92％.结论:重组TRAIL以可溶形式得到高效表达,且具有较好的生物学活性,为其开发成药用蛋白奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙丽霞	齐鲁制药有限公司药物研究院	6	15	3.0	3.0
2	王晶翼	齐鲁制药有限公司药物研究院	14	25	4.0	4.0
3	王庆民	齐鲁制药有限公司药物研究院	7	14	3.0	3.0
4	赵雪娜	齐鲁制药有限公司药物研究院	2	5	1.0	2.0
5	武国栋	齐鲁制药有限公司药物研究院	2	6	1.0	2.0
6	黄山英	齐鲁制药有限公司药物研究院	1	1	1.0	1.0
7	薛彤彤	齐鲁制药有限公司药物研究院	2	6	1.0	2.0