小鼠不成熟CD8α+树突状细胞的免疫抑制功能的体外实验

• 作者: 彭延文 徐霖 曹开源 李树浓 纳宁 陈康 项鹏
• 来源期刊: 中华器官移植杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 树突细胞 小鼠 淋巴细胞培养试验,混合
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 6-10
• 分类号: R3
• 字数: 4953字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-1785.2011.01.003

摘要

目的 观察不成熟CD8α+树突状细胞(DC)的体外免疫抑制功能.方法 取C57BL/6(H-2b)小鼠和Balb/c(H-2d)小鼠的骨髓和脾脏,制备不成熟CD8α+DC和脾淋巴细胞,并经丝裂霉素处理.采用甲基噻唑基四唑(MTT)法,实验设混合淋巴细胞反应(MLR)组(阳性对照组)、MLR加不同密度的同系CD8α+DC组、MLR加不同密度同种异型CD8α+DC组、MLR加不同密度CD8α+DC的培养上清组、CD8α+DC加同系T淋巴细胞组及阴性对照组.MLR组按刺激细胞/反应细胞10∶1建立.CD8α+DC按与反应细胞比例0.2∶1、0.5∶1、0.8∶1和1∶1的梯度加入MLR中分别建立同系CD8α+D组和同种异型CD8α+D组;MLR中加入不同密度(1×105/ml～5×106/ml)CD8α+DC的培养上清液建立CD8α+DC上清组;CD8α+DC与同系淋巴细胞共培养建立CD8α+DC加同系T淋巴细胞组;以反应细胞2×105/孔作为阴性对照.采用酶联免疫吸附试验法检测MLR加同系CD8α+DC组(1∶1)上清液中γ干扰素(IF-γ)和白细胞介素10(IL-10)的浓度.结果 同系和同种异型不成熟CD8α+DC对MLR均有抑制作用(P＜0.05),二者间差异无统计学意义(P＞0.05).抑制作用随DC比例的增加而增强,当CD8α+DC/反应细胞比例大于0.2时显示抑制作用(P＜0.05),比例为1时抑制作用最强.CD8α+DC体外刺激同系淋巴细胞增殖的能力较弱,当DC与T淋巴细胞的比值大于2时,显示出一定的刺激作用(P＜0.05),其培养上清液对MLR也有抑制作用(P＜0.05),其中密度5×105/ml的细胞培养上清液抑制作用最强.MLR加同系CD8α+DC组(1∶1)上清液中IL-10的含量为(451.9±12.2)pg/ml,IFN-γ的含量为(1.0±1.2)pg/ml.结论 不成熟CD8α+DC体外具有免疫抑制或诱导免疫耐受的功能,可产生较高水平的IL-10,CD8α+DC及其培养上清液均可抑制MLR.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	纳宁	中山大学附属第三医院肾移植科	29	135	5.0	10.0
2	曹开源	中山大学附属第三医院肾移植科	61	218	8.0	10.0
3	徐霖	中山大学附属第三医院肾移植科	37	123	6.0	9.0
4	项鹏	中山大学附属第三医院肾移植科	45	297	10.0	15.0
5	陈康	中山大学附属第三医院肾移植科	17	42	3.0	5.0
6	李树浓	中山大学附属第三医院肾移植科	38	248	9.0	14.0
7	彭延文	中山大学附属第三医院肾移植科	12	35	4.0	5.0