摘要:
目的 探讨转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1/Smad信号传导通路在肾小球系膜细胞(glomerular measanial cell,GMC)中的作用,观察血管紧张素转化酶抑制剂(angiotensin-converting enzyme inhibitor,ACEI)福辛普利(fosinopril,Fos)在该通路中对磷酸化Smad2/3(phosphorylation-Smad2/3,P-Smad2/3)和I型胶原蛋白(collagen I,Col I)表达的影响,阐明福辛普利的肾保护作用机制.方法 采用经典方法进行大鼠肾小球系膜细胞复苏、培养和传代后,将其按处理方式分为3组:①TGF-β1组(TGF-β 5 ng/mL处理);②Fos组(TGF-β1 5 ng/mL+Fos 1×10-4mol/L处理);③对照组(空白).甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法分别检测3组肾小球系膜细胞增殖光密度(optical density,OD)值,计算细胞抑制率;间接免疫荧光法检测磷酸化Smad2/3表达情况;酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法测定I型胶原蛋白的变化,计算抑制率.结果 各时间点肾小球系膜细胞增殖荧光强度比较,TGF-β1组明显高于对照组,Fos组低于TGF-β1组,差异有显著意义(P<0.05).磷酸化Smad2/3在对照组仅极微量表达,TGF-β1组在刺激30 min后,荧光强度显著增强,且集中于细胞核.与TGF-β1组相比,Fos组磷酸化Smad2/3表达下降,细胞荧光强度较弱,差异有显著意义(P<0.05).对照组I型胶原蛋白仅少量基础性分泌.与对照组相比,TGF-β1组在各时间点I型胶原蛋白分泌量显著上升,差异有显著意义(P<0.05);与TGF-β1组比较,Fos组I型胶原蛋白在15 min和6 h的表达量比较,差异无显著意义(P>0.05);在12 h和24 h比较,差异有显著意义(P<0.05).结论 人重组转化生长因子-β1能激活体外培养的大鼠肾小球系膜细胞磷酸化-Smads表达,并激活转化生长因子-β/Smads信号途径,该途径激活能致 I 型胶原分泌增多,并能诱导肾小球系膜细胞增殖,其作用呈一定的时间依赖性关系.福辛普利能部分阻断转化生长因子-β/Smads信号传导通路在大鼠肾小球系膜细胞的激活,抑制 I 型胶原分泌及肾小球系膜细胞增殖,其抑制作用呈一定的时间依赖性关系.