透明颤菌血红蛋白基因在地衣芽孢杆菌ATCC9945a中的表达及作用

• 作者: 孙廷丽 施庆珊 欧阳友生 谢小保 陈仪本
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 地衣芽胞杆菌 透明颤菌血红蛋白 穿梭表达载体 聚γ-谷氨酸
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 16-22
• 分类号: Q812
• 字数: 5587字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2011.05.117

摘要

目的:研究透明颤菌血红蛋白基因(vgb)在产聚γ-谷氨酸(γ- PGA)的地衣芽孢杆菌ATCC9945a中的表达及对其生物量和产量的影响.方法:以大肠杆菌-枯草芽孢杆菌的穿梭表达载体pUBC19为骨架,构建含有枯草芽孢杆菌的组成型启动子P43和透明颤菌血红蛋白结构基因的穿梭表达载体pUBC19 - PV,并通过电击转化得到重组的产γ-PGA的地衣芽孢杆菌(B.licheniformis).一氧化碳差光谱验证重组B.licheniformis 中是否表达了有活性的血红蛋白.摇瓶发酵试验研究重组菌株和对照菌株生物量和发酵产物产量的变化.结果表明,重组菌株的生长明显比对照菌株快,但是γ - PGA的产量却比原始菌株低:在正常供氧时,其产量12.8g/L,比亲株产量21.7g/L下降了41%,贫氧环境下产量8.8g/L,比亲株产量12.8g/L降低了31%.结论:vgb 在重组菌株中表达了有活性的的透明颤菌血红蛋白,并可以促进细胞的生长,但聚谷氨酸的产量却有所下降.文章针对聚γ-谷氨酸产量的下降原因进行了讨论,并对下一步的工作提出了建议.