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抗人gp130单克隆抗体的制备及其生物学特性分析
抗人gp130单克隆抗体的制备及其生物学特性分析
作者:
余奇文
张冬青
张继英
苗平
赵蓉
钱柳
陆梅生
陈雪华
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
IL-6
gp130
单克隆抗体
特异性
亲和力
摘要:
目的:制备小鼠抗人IL-6Rβ(gp130)单克隆抗体,并分析其生物学特性及初步的免疫学功能.方法:用gp130抗原免疫BALB/c小鼠,经三次免疫获得高效价的ELISA结果后,取小鼠的脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经多次亚克隆筛选得到稳定分泌抗gp130单克隆抗体的杂交瘤细胞株.大量扩增杂交瘤细胞,收集细胞上清,随即过亲合层析柱进行纯化,对经纯化的抗人gp130单克隆抗体进行亚型鉴定,用Western blot及间接ELISA、biacore方法分析抗人gp130单克隆抗体的纯度、特异性及亲和力,用FACS术检测抗人gp130单克隆抗体与膜表面富含IL-6受体的U266细胞系的结合率,同时建立IL-6诱导的U266细胞增殖系统,用以检测和分析抗人gp130单克隆抗体的抑制和阻断效应.结果:本研究获得了多株能够稳定分泌抗人gp130单克隆抗体的细胞株,取其中一株(14C4)进行分析,表明其亚型属于IgG2b,轻链为κ链,经Western blot及间接ELISA证明此株抗体有较高的纯度及特异性,biacore结果显示14C4与抗原结合的亲和力为2.62E-10,FACS结果证实能与U266细胞表面的gp130特异性结合,并且呈剂量依赖性,细胞增殖实验说明14C4在一定程度上可抑制IL-6诱导的U266细胞的增殖.结论:初步成功制备了抗gp130单克隆抗体,并且具备较好的生物学特性,为研究人IL-6gp130在抗感染、炎症以及肿瘤和自身免疫病学中的诊断和治疗中的意义提供了有效的工具和手段.
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篇名
抗人gp130单克隆抗体的制备及其生物学特性分析
来源期刊
中国免疫学杂志
学科
医学
关键词
IL-6
gp130
单克隆抗体
特异性
亲和力
年,卷(期)
2011,(12)
所属期刊栏目
会义优秀论文选登
研究方向
页码范围
1119-1122,1128
页数
分类号
R392
字数
4331字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1000-484X.2011.12.16
五维指标
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被引次数趋势
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gp130
单克隆抗体
特异性
亲和力
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国免疫学杂志
主办单位:
中国免疫学会
吉林省医学期刊社
出版周期:
月刊
ISSN:
1000-484X
CN:
22-1126/R
开本:
大16开
出版地:
长春市建政路971号
邮发代号:
12-89
创刊时间:
1985
语种:
chi
出版文献量(篇)
7702
总下载数(次)
13
总被引数(次)
40225
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