拟南芥水杨酸受体表达与在体转录水平的研究

• 作者: 林岚 谭仁祥
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 拟南芥 水杨酸受体蛋白 异源表达 逆转录PCR
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 34-39
• 分类号: Q785|Q786
• 字数: 5565字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2011.05.121

摘要

目的:从拟南芥叶中克隆水杨酸结合蛋白(SA binding protein 2,SABP2,也称水杨酸受体)基因sabp2进行异源表达并测定其活性.方法:从拟南芥叶RNA中通过反转录PCR扩增sabp2,将PCR产物克隆至载体pMD - 19T simple中,经测序验证后,再基于pET28a构建重组表达载体,转化至大肠杆菌BL21( DE3)并表达,检测重组蛋白的活性.另一方面,对sabp2在拟南芥中转录水平进行了研究.结果:PCR获得792bp的sabp2基因,并成功构建异源表达载体pET28a - sabp2.优化结果表明,在0.4mmol/L IPTG诱导下20℃培养8h,表达产物活性较强,具天然SABP2的特征性酯酶活性.该基因在拟南芥叶中转录模式呈SA应激性和组织特异性.结论:sabp2成功表达,不仅为筛选SA受体拮抗剂提供新的原核体系,而且为探讨SA与SABP2相互作用在植物防御过程中时空变化奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谭仁祥	南京大学生命科学学院功能生物分子研究所	39	762	19.0	27.0
2	林岚	东南大学医学院生物工程系	6	217	4.0	6.0