猪繁殖与呼吸综合征病毒重组N蛋白间接ELISA检测方法的建立

• 作者: 买买提艾力·斯迪克 冉多良 吴星星 张伟 沙娜瓦尔·塔希 王传锋 茹鲜古丽·木明
• 来源期刊: 新疆农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 重组质粒 重组N蛋白 猪繁殖与呼吸综合征病毒 间接ELISA检测方法
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 53-58
• 分类号: S851.659.6
• 字数: 4205字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-8614.2011.01.013

摘要

在最佳条件下,通过对重组质粒pGEX-6P-N进行诱导表达,并利用Glutathione Sepharose 4B亲和吸附柱对表达产物(重组N蛋白)进行纯化.用重组N蛋白作为包被抗原,通过对相关条件进行优化(如抗原包被量,血清稀释度,酶标二抗最佳工作浓度,底物作用时间等),确定判定标准,最终初步建立了检测PRRSV抗体的间接ELISA方法.用建立的间接ELISA方法检测360份血清样品,并与IDEXX公司研制的ELISA试剂盒检测的结果相比较,批内重复性试验变异系数均值为1.52%,批间变异系数为6.17%,符合率达92.5%,试验表明,建立的间接ELISA检测方法具有良好的重复性和特异性,可用于PRRSV血清抗体的检测.