草鱼肾细胞中细胞色素P4503A基因诱导表达及其酶活性分析

• 作者: 喻文娟 杨先乐 章海鑫 符贵红 胡鲲 黄宣运
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 细胞色素P4503A 肾细胞 草鱼 CYP3A基因和酶活性 诱导表达 利福平
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 720-727
• 分类号: S941
• 字数: 4476字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2011.00720

摘要

采用基因克隆技术获取草鱼(Ctenopharyngodon idellus)细胞色素P450 3A(CYP3A)cDNA序列长1 849 bp,包含完整开放阅读框(open reading frame,ORF)1 542 bp,1个终止密码和含polyA信号3'UTR； ORF编码514个氨基酸,含信号肽(29 aa),2个跨膜螺旋区(23 aa,23 aa),血红素结合域(21 aa)和6个底物识别位点(SRSl-6)；与其他脊椎动物CYP3A氨基酸序列相似度达60％ ～ 92％.用实时定量PCR和分光光度计法分别研究了草鱼肾细胞系(Ctenopharyngodon idellus kidney cell line CIK)中利福平(rifampicin,RIF)诱导CYP3A基因表达和红霉素-N-脱甲基酶(ERND)活性,采用红霉素脱甲基酶活性法测定CYP3A的活性.结果显示,诱导组CIK细胞中CYP3A mRNA表达量在8最高,而CYP3A酶活在10h最高；CYP3A mRNA和酶活性与对照组均具显著差异性（P<0.05）.CYP3A转录水平先于相应酶活变化表达,且转录水平表达显著高于酶活性,这很可能反映了RIF对CYP3A的诱导主要作用于转录水平而不直接作用于酶活,本研究旨为药物对CYP3A转录调控和活性调节提供科学依据,并为渔药代谢酶的研究提供理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡鲲	上海海洋大学水产与生命学院	34	247	8.0	14.0
2	章海鑫	上海海洋大学水产与生命学院	7	14	2.0	3.0
3	杨先乐	上海海洋大学水产与生命学院	69	353	10.0	16.0
4	喻文娟	上海海洋大学水产与生命学院	4	6	1.0	2.0
5	符贵红	上海海洋大学水产与生命学院	2	38	2.0	2.0