沉默TSP-1基因对亚溶解型C5b-9复合物诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

• 作者: 冯雪凤 吴宜琴 王迎伟 车楠 邱文
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 肾小球系膜细胞 亚溶解型C5b-9复合物 血小板反应蛋白-1 增殖 α-平滑肌肌动蛋白
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 369-374
• 分类号: R392.31
• 字数: 4941字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2011.05.001

摘要

目的:研究沉默血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)基因对于亚溶解型(sublytic)C5b-9复合物诱导大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)增殖的影响.方法:设计合成针对TSP-1基因的发夹式siRNA(small hair RNA,shRNA),并构建相应的表达质粒,将TSP-1 shRNA(shTSP-1)转染体外培养的大鼠GMC,再给予亚溶解型C5b-9刺激.以实时PCR和蛋白质印迹法检查各组GMC中TSP-1、细胞周期蛋白D2(cyclin D2)及增殖细胞核抗原(proliferative cell nuclear antigen,PCNA)的mRNA及蛋白表达情况.另用3H-胸腺嘧啶核苷酸掺入法(3H-thymidine incorporation,3H-TdR)和CCK-8(cell counting kit-8)方法分别检查GMC的DNA合成及细胞数量的改变.最后,观察各组GMC中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达情况.结果:使用shTSP-1沉默TSP-1基因,对于亚溶解型C5b-9刺激GMC后18 h诱导的cyclin D2和PCNA表达及DNA合成均无显著影响,但是shTSP-1能够抑制亚溶解型 C5b-9刺激GMC 54 h时细胞数量的增加,同时能下调由亚溶解型 C5b-9刺激GMC引起的α-SMA表达.结论:用shTSP-1沉默GMC中的TSP-1基因,可抑制亚溶解型C5b-9刺激GMC的增殖和α-SMA的合成,shTSP-1对GMC增殖的影响可能与其下调α-SMA的表达有一定关系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王迎伟	南京医科大学微生物与免疫学系	49	239	9.0	14.0
2	吴宜琴	南京医科大学微生物与免疫学系	8	57	5.0	7.0
3	邱文	南京医科大学微生物与免疫学系	26	30	3.0	5.0
4	车楠	南京医科大学微生物与免疫学系	4	3	1.0	1.0
5	冯雪凤	南京医科大学微生物与免疫学系	2	2	1.0	1.0