慢病毒介导BMP2和VEGF165基因共转染对骨髓基质干细胞成骨分化的影响

• 作者: 曾炳芳 范存义 蒋佳
• 来源期刊: 上海交通大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 骨形成蛋白2 血管内皮生长因子165 共转染 慢病毒载体 成骨分化
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 753-758
• 分类号: Q813|R68
• 字数: 4061字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2011.06.016

摘要

目的 观察慢病毒介导骨形成蛋白2(BMP2)和血管内皮生长因子165(VEGF165)基因共转染对骨髓基质干细胞(MSCs)成骨分化的影响.方法 构建携带BMP2、VEGF165和绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组慢病毒表达载体,包装、生产携带BMP2、VEGF165和GFP基因的重组慢病毒(Lv-BMP、Lv-VEGF、Lv-GFP).分离、培养Wistar大鼠骨髓MSCs,分别以Lv-GFP(GFP组)、Lv-BMP(BMP组)、Lv-VEGF(VEGF组)转染MSCs,Lv-BMP和Lv-VEGF共转染MSCs(BMP+VEGF组),另设未转染MSCs对照组.RT-PCR法检测转染后7 d各组细胞BMP2、VEGF165 mRNA表达以及转染后1、2、4周各组细胞骨钙素(OCN)mRNA表达；ELISA法检测转染后1、4、8周各组细胞培养上清液BMP2、VEGF165蛋白表达以及转染后1、2、4周各组细胞培养上清液OCN蛋白表达；转染后第14天,各组细胞行碱性磷酸酶(ALP)染色和ALP活性检测.结果 BMP+VEGF组BMP2、VEGF165 mRNA和蛋白高效共表达,BMP2 mRNA和蛋白表达与BMP组比较差异无统计学意义(P＞0.05),VEGF165 mRNA和蛋白表达与VEGF组比较差异无统计学意义(P＞0.05)；对照组、GFP组和VEGF组无BMP2mRNA和蛋白表达；对照组、GFP组和BMP组无VEGF165 mRNA和蛋白表达；BMP+VEGF组OCN mRNA和蛋白表达显著高于其他各组(P＜0.01).BMP+VEGF组ALP染色阳性区域大于对照组、VEGF组和BMP组；BMP+VEGF组ALP活性显著高于其他各组(P＜0.01).结论 慢病毒介导BMP2和VEGF165基因共转染可促进骨髓MSCs成骨分化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾炳芳	上海交通大学附属第六人民医院骨科	428	5651	33.0	53.0
2	范存义	上海交通大学附属第六人民医院骨科	121	872	17.0	23.0
3	蒋佳	复旦大学运动医学中心华山医院运动医学与关节镜外科	22	72	5.0	6.0