猪囊尾蚴谷胱甘肽S-转移酶的表达研究

• 作者: 包怀恩 方文 牟荣 肖靓靓
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 猪带绦虫 囊尾蚴 谷胱甘肽S-转移酶 免疫组化 双向电泳 蛋白质印迹
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 398-402
• 分类号: R383.2
• 字数: 4099字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2011.05.008

摘要

目的 应用免疫组化、双向电泳(2-DE)结合蛋白质印迹(Western-blotting)技术分析猪囊尾蚴谷胱甘肽S-转移酶(GST)的表达.方法 用猪带绦虫卵1 mL(8万个/mL)灌胃20d龄健康乳猪6头,于感染后40d、80d和120 d分别宰杀2头猪并取含囊尾蚴的肌肉及肝脏(120 d除外)制作4μm厚石蜡切片,采用Envision二步法,观察不同时期寄生在肌肉及肝脏的猪囊尾蚴GST的表达;同时制备感染后40d取自肌肉的猪囊尾蚴蛋白进行2-DE分析,将凝胶蛋白斑点转移至聚偏氟乙烯膜(PVDF膜),用本课题组自制的大鼠抗猪带绦虫GST血清作为一抗、健康大鼠血清作为阴性对照进行western-blotting分析.结果 不同时期寄生在肌肉及肝脏的猪囊尾蚴均表达GST,随感染时间增加,寄生在肌肉的猪囊尾蚴GST的表达变化不大(P＞0.05),寄生在肝脏的猪囊尾蚴GST的表达升高(P＜0.05);双向电泳凝胶共检测到207±9个蛋白质斑点,相对分子质量(Mr)为14 400～94 000,等电点(pI)为3.0～10.0.Western-blotting分析显示,实验组特异性抗原抗体阳性杂交斑点为1个,阴性对照未见阳性杂交斑点.将Western-blotting检测的抗原抗体阳性杂交斑点与原双向电泳凝胶斑点进行比对,找到对应蛋白斑点,经ImageMaster 2D Platinum 5.0软件分析后初步确定该蛋白斑点的pI/Mr为6.6/25 548,与猪带绦虫GST的理论推导值接近.结论 感染时间及感染部位组织学特征不同,猪囊尾蚴GST的表达略有差异.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	包怀恩	贵阳医学院寄生虫学教研室	110	773	14.0	22.0
2	方文	贵阳医学院医学检验系	20	44	3.0	6.0
3	牟荣	贵阳医学院寄生虫学教研室	30	146	9.0	11.0
4	肖靓靓	贵阳医学院寄生虫学教研室	11	24	3.0	4.0