靶向Cdc6RNAi抑制舌癌CAL-27细胞的增殖

• 作者: 冯崇锦 罗冬元 路晓薇 郭俊兵
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 舌癌 DNA复制 Cdc6 RNA干扰 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 页码范围: 594-599
• 分类号: R378
• 字数: 3712字
• 语种: 中文

摘要

摘要:[目的]应用RNA干扰技术,靶向抑制舌癌细胞中Cdc6的表达,观察舌癌细胞增殖、凋亡等改变,初步探讨下调Cdc6表达抑制舌癌细胞增殖的分子机制.[方法]实验分4组:空白对照组CON,阴性对照组NC,实验组KD1和KD2.应用前期构建的Cdc6的慢病毒载体,转染舌癌CAL-27细胞,通过Real time RT-PCR和Western blot法检测Cdc6 mRNA及蛋白的表达；以MTT法测定活细胞数并绘制细胞生长曲线;利用流式细胞仪观察细胞凋亡.[结果]慢病毒载体转染CAL-27细胞后,Real time RT-PCR和Western blot实验结果显示:舌癌CAL-27细胞中Cdc6的表达明显被抑制,相对NC组,KD1、KD2组对Cdc6基因敲减效率分别为55.60％和64.38％.蛋白表达分别降低44.44％和66.67％；细胞生长曲线表明,细胞生长明显减缓,KD1和KD2组细胞生长抑制率分别为33.68％和35.79％；流式细胞仪检测细胞周期显示:KD1组、KD2组两组细胞凋亡率较NC组均有显著上升,分别为57.55％和83.81％.[结论]靶向Cdc6慢病毒载体RNA干扰能有效抑制舌癌CAL-27细胞的DNA复制,阻止舌癌细胞的增殖.