pmCherry-N1-WWOX真核表达载体的构建及其在胆管癌细胞QBC939中的表达

• 作者: 朱凯 黄强
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 基因,肿瘤抑癌 基因表达 胆管肿瘤
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 页码范围: 328-332
• 分类号: R735.8|R394.2
• 字数: 2772字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2011.04.007

摘要

目的 构建人脆性位点抑癌基因WWOX真核表达载体,并观察其在人胆管癌细胞株QBC939中的表达.方法 通过全基因合成的WWOX cDNA为模版,用PCR技术扩增,将扩增片段连接到PUC57质粒,构建克隆载体,鉴定出阳性克隆后用 DNA测序法鉴定重组质粒.将克隆载体与pmCherry-N1同时用Xho I/BamH I双酶切,构建真核表达载体pmCherry-N1-WWOX,以重组质粒转染QBC939细胞,通过Western blot检测转染细胞中WWOX的表达.结果 成功扩增WWOX基因片段,重组质粒的酶切鉴定及测序结果均证明WWOX基因成功克隆到真核表达载体中,Western blot结果证实转染重组质粒后的QBC939细胞WWOX蛋白表达增强.结论 成功构建出含人WWOX基因的真核表达质粒,并将重组质粒pmCherry-N1-WWOX转染到QBC939细胞,为研究WWOX基因在肿瘤发生、发展中的作用提供了有效的分子工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱凯	安徽医科大学附属省立医院普外科	9	25	4.0	4.0
2	黄强	安徽医科大学附属省立医院普外科	141	861	14.0	23.0