E2F1的siRNA真核表达载体转染对胆管癌细胞的作用

• 作者: 唐滔 汪昕 苏瑛 邹声泉 陈波
• 来源期刊: 中国普通外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胆管肿瘤 转录因子 E2F1 siRNA 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 130-133
• 页数: 4页
• 分类号: R735.8
• 字数: 2698字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-6947.2008.02.008

摘要

目的 探讨E2F1蛋白信号的转导通路对胆管癌细胞凋亡的影响中的作用.方法 根据E2F1基因cDNA序列,设计针对目的基因的4个siRNA靶序列,将其插入U6启动子下游,克隆到真核表达载体pGsensil中,通过酶切鉴定和DNA测序鉴定.采用脂质体介导法将构建好的4个siRNA表达载体分别转染于QBC939细胞中;以RT-PCR检测E2F1基因在转染前后的表达,流式细胞术检测转染后对细胞凋亡率的影响.结果 重组质粒酶切后呈线性化,酶切鉴定及DNA测序结果显示插入片断正确.转染48h后,4个siRNA表达载体均抑制了E2F1 mRNA的表达,沉默E2F1基因后细胞的凋亡率显著增加.结论 E2F1的siRNA真核表达载体转染QBC939细胞后,该表达载体具有抑制E2F1基因表达、促进细胞凋亡的功能,可以用于后续胆管癌的实验研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹声泉	华中科技大学同济医学院附属同济医院胆胰外科	221	1228	15.0	22.0
2	陈波	华中科技大学同济医学院附属同济医院胆胰外科	64	291	8.0	14.0
3	汪昕	华中科技大学同济医学院附属同济医院胆胰外科	6	24	3.0	4.0
4	苏瑛	华中科技大学同济医学院附属同济医院胆胰外科	5	9	2.0	3.0
5	唐滔	广东省深圳市龙岗中心医院普通外科	7	27	3.0	5.0