反义MBD1基因真核表达载体转染对人胆管癌细胞MBD1基因表达的影响

• 作者: 刘民锋 左石 徐立宁 李占飞 罗剑 董泾青 邹声泉 郭伟
• 来源期刊: 中国普通外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: DNA,反义 胆管肿瘤/病因学 转染 基因表达
• 年，卷（期）: 2005,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 909-913
• 页数: 5页
• 分类号: R575.7|R349.64
• 字数: 3577字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-6947.2005.12.009

摘要

目的探讨反义MBD1基因真核表达载体转染对人胆管癌QBC-9 39细胞中MBD1基因表达的影响,为进一步研究该基因的作用提供依据.方法构建反义MBD1基因真核表达载体,通过脂质体转染入人胆管癌细胞株QBC-939中,以G41 8进行筛选得到稳定转染细胞株,用PCR鉴定外源性neoR基因在转染细胞中的表达以确定转染成功.半定量RT-PCR观察转染前后MBD1基因mRNA水平的变化,流式细胞术检测转染前后MBD1蛋白的变化.结果人胆管癌QBC-9 39细胞中MBD1基因的mRNA水平从0.912±0.022降低至0.215±0.017,转染前后的差异有显著性(P＜0.01);MBD1蛋白水平从(80.19±5.05)%降低到(35.11±4.05)%,转染前后的差异有显著性(P＜0.01).结论反义MBD1基因转染能降低人胆管癌QBC-939细胞中MBD1基因的表达水平,提示MBD1基因在胆管癌的发生发展中具有重要作用,反义MBD1基因转染有可能成为胆管癌治疗的一种新方法.