利用小鼠模型的脲酶免疫刺激物效果评价

• 作者: 卜登攀 周凌云 王加启 章玉涛 胡小丽 赵圣国
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 小鼠 脲酶 免疫刺激物 抗体效价
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 107-111
• 分类号: Q556.4
• 语种: 中文

摘要

建立小鼠模型时制备的脲酶免疫刺激物进行免疫效果及其安全性评价.利用IPTG诱导脲酶基因克隆菌,大量表达脲酶UreB蛋白,用SDS-PAGE及Bradford方法对表达产物进行定性和定量分析;将脲酶UreB蛋白与弗氏(不)完全佐剂混合并乳化,制备成脲酶免疫刺激物.选择健康昆明小白鼠40只,随机分为4组,分别注射脲酶免疫刺激物、弗氏(不)完全佐剂和生理盐水,同时设置非注射为空白对照.利用间接ELISA测定特异性抗体效价,利用血常规分析仪和流式细胞仪测定小鼠血常规.结果表明:构建克隆菌株可以大量表达脲酶B蛋白,质量浓度为0.39 mg/mL.小鼠血清中特异性IgG抗体效价能达到1:10 000以上,显著高于其他3个对照组(P＜0.05),而特异性抗体IgA和IgM效价与对照组比较差异不显著(P＞0.05).脲酶免疫刺激物能显著提高小鼠血中白细胞、淋巴细胞和中间细胞数及比例(P＜0.05),而对血液其他指标没有显著影响(P＞0.05).本试验成功制备脲酶免疫刺激物,并能有效刺激机体免疫应答,为后期奶牛免疫试验打下基础.