细胞周期素D2启动子曲古菌素A效应区域的研究

• 作者: 姜雪莲 李潇婷 杨方 田炜 胡倩倩 谭菲菲 郝小惠 郭志义
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞周期素D2 启动子 报告基因 曲古菌素A
• 年，卷（期）: 2011,（14）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1458-1461
• 分类号: R979.1|R966|R394-33
• 语种: 中文

摘要

目的 研究在曲古菌素A(trichostatin A,TSA)处理条件下细胞周期素D2的调控机制.方法 细胞周期素D2的mRNA水平通过RT-PCR方法 检测.细胞周期素D2的启动子片段以A549细胞基因组DNA为模板,通过高保真PCR扩增获得,并克隆到pGL3-BASIC载体中;并以此为基础通过高保真PCR扩增出不同长度的启动子片段.启动子相对活性通过萤火虫酶报告基因方法 确定.结果 在TSA处理条件下,细胞周期素D2的mRNA水平上升.共构建4个以不同长度细胞周期素D2启动子片段驱动的报告基因质粒,分别命名为pGL3-1816CD2-LUC、pGL3-1358CD2-LUC、pGL3-720CD2-LUC和pGL3-524CD2-LUC.在TSA处理条件下,启动子活性的变化在-524 bp删切质粒时消失.结论 TSA条件下细胞周期素D2 mRNA水平上升是启动子依赖的;细胞周期素D2启动子的TSA效应区域在-720～-524 bp之间.