甲基营养菌Methylobacterium sp.MB200中部分一碳代谢相关基因的定位及 mtdA 和 mtdB基因的克隆研究

• 作者: 唐咸来 宋修鹏 武波 田丹丹 申佩弘 蒋承建
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 甲基营养菌 突变体库 pTnMod-RKm' TAIL-PCR mtdA mtdB
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 50-55
• 分类号: Q785
• 语种: 中文

摘要

以甲基营养细菌Methylobacterium sp.MB200为出发菌株,首先利用质粒转座子(pTnModRKm')构建了目的菌株MB200的部分突变体库,获得能够在双抗性MMII板上生长的突变体共11552株,然后在双抗性MMI板上复筛获得不能够利用甲醇的突变体333株(初步认为是一碳代谢途径被破坏的突变株),为一碳代谢相关基因的克隆研究奠定了基础.随后利用TAIL-PCR技术快速准确地从突变体库中定位了部分与一碳代谢相关的基因,并根据pTnMod-RKm'具有复制起始位点能够快速克隆插入位点侧翼序列的特性克隆到mtdA和mtdB基因的全序列并进行了初步分析.