半滑舌鳎微卫星标记的开发及其在F1家系中分离方式分析

• 作者: 于海洋 刘俊伟 刘志鹏 姜黎明 张全启 王志刚 王旭波 翟介明
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 半滑舌鳎 微卫星 富集文库-菌落原位杂交 孟德尔分离
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1384-1391
• 分类号: S917
• 字数: 4897字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2011.01381

摘要

利用富集文库-菌落原位杂交的方法筛选半滑舌鳎( Cynoglossus semilaevis)微卫星标记,构建富含(AC)和(AG)序列重复的半滑舌鳎微卫星富集文库,随机从文库中挑选1060个克隆,筛选得到883个(83.3％)阳性信号,菌落PCR检测742个阳性克隆片段的长度在500～1 200 bp范围内,随机挑选其中50个克隆进行测序,共设计引物33对,进行退火温度优化、多态性检测后,共得到20个多态的半滑舌鳎微卫星标记.对其进行分离方式分析,其中有17个位点符合孟德尔分离定律,共表现5种分离方式,可用于半滑舌鳎遗传连锁图谱的构建；另外有3个位点偏离孟德尔分离定律(P＜0.05).结果同时证明富集文库-菌落原位杂交是半滑舌鳎微卫星标记大量筛选和高密度遗传连锁图谱构建的一种行之有效的方法.