猪圆环病毒2型CaP蛋白的表达及在ELISA中的初步应用

• 作者: 徐志文 朱玲 李凤勤 漆信桥 赵玲 郭万柱
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 圆环病毒2型 Cap蛋白 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 808-814
• 分类号: S859.659.2
• 字数: 5660字
• 语种: 中文

摘要

本研究旨在建立以PCV2 Cap蛋白为包被抗原的间接ELISA检测方法,构建猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因原核表达质粒pET32a-ORF2并转化至Rosetta菌,在1.0 mmol·L-1 IPTG和37℃条件下诱导下,Cap蛋白获得高效表达,Western blot检测证实其具有免疫反应活性,以纯化的蛋白为抗原建立了检测猪圆环病毒2型抗体的间接ELISA方法.结果表明抗原最适包被浓度为2.16μg·mL-1;血清最佳稀释度为1:40;抗原最佳包被条件为4℃过夜;最佳封闭条件为1%BSA 37℃1 h;血清反应时间为37℃30 min;酶标二抗最适作用时间为37℃45 min;底物最佳反应条件为37℃显色15 min.用该方法对四川省184份猪血清样品进行检测,总阳性率为80.98%(149/184),与商品化的PCV2 ELISA试剂盒得到的结果基本一致.本试验成功建立了PCv2血清抗体间接ELISA方法,具有较高的敏感性和特异性,可用于大规模的血清学检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱玲	四川农业大学动物生物技术中心	151	499	13.0	17.0
2	郭万柱	四川农业大学动物生物技术中心	166	1465	21.0	28.0
3	徐志文	四川农业大学动物生物技术中心	184	909	15.0	20.0
4	赵玲	四川农业大学动物生物技术中心	20	182	7.0	13.0
5	漆信桥	四川农业大学动物生物技术中心	6	30	3.0	5.0
6	李凤勤	四川农业大学动物生物技术中心	1	7	1.0	1.0