WT-L1与Co(Ⅱ)-L1的光谱表征及催化水解β-内酰胺类抗生素的动力学研究

• 作者: 冯吉利 杨科武 杨霞 闫小艳 高会洲
• 来源期刊: 中国抗生素杂志
• 关键词: 金属β-内酰胺酶L1 金属酶重组 光谱表征 β-内酰胺类抗生素 酶催化动力学
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 药理与临床
• 页码范围: 388-393
• 分类号: R978.1<'+>1
• 语种: 中文

摘要

目的 表征金属β-内酰胺酶(MBL)L1的结构和动力学特性,以其发展MBL的通用型抑制剂.方法 在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达并纯化野生型L1(Wild type L1,WT-L1),以SDS-PAGE电泳确认;用EDTA除去WT-L1中的Zn(Ⅱ)离子得Apo-L1,再用Co(Ⅱ)滴定制得Co(Ⅱ)-L1;通过UV-vis,CD及荧光光谱表征WT-L1及Co(Ⅱ)-L1活性中心的结构;采用稳态动力学方法测定WT-L1及Co(Ⅱ)-L1催化3类9种β-内酰胺类抗生素水解反应的酶动力学参数,确定抗生素对L1的稳定性.结果 获得纯化的WT-L1和重组的Co(Ⅱ)-L1;光谱表征表明L1具有两个金属活性中心,Co(Ⅱ)-L1的二级结构发生显著变化;WT-L1对碳青霉烯类抗生素的酶促活性最强,青霉素类次之,头孢类抗生素较弱,Co(Ⅱ)-L1比WT-L1的酶催活性弱.结论 Co(Ⅱ)-L1的重组实现了对MBL-L1的结构表征,L1对青霉素类抗生素呈现强的催化活性,对头孢类抗生素稳定.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	闫小艳	合成与天然功能分子化学教育部重点实验室西北大学化学与材料科学学院	1	0	0.0	0.0
2	高会洲	合成与天然功能分子化学教育部重点实验室西北大学化学与材料科学学院	1	0	0.0	0.0
3	冯吉利	合成与天然功能分子化学教育部重点实验室西北大学化学与材料科学学院	1	0	0.0	0.0
4	杨霞	合成与天然功能分子化学教育部重点实验室西北大学化学与材料科学学院	1	0	0.0	0.0
5	杨科武	合成与天然功能分子化学教育部重点实验室西北大学化学与材料科学学院	1	0	0.0	0.0