重组人维甲酸X受体α的克隆与表达及其与甲状腺受体的结合

• 作者: 孙蓓 左爱军 张莹 张镜宇 胡丽玲 谢伟
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 医学
• 关键词: 维甲酸X受体α 巢式PCR 免疫共沉淀
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 246-250
• 分类号: R3
• 字数: 3981字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1005.2011.00246

摘要

维甲酸X受体α(RetinoidX receptor-α,RXR-α)属于核受体家族,在调节基因转录及信号转导方面发挥着重要的作用.为了深入研究RXR-α的生物学作用,文章利用RT-PCR技术扩增了人RXR-α基因,并将其克隆入原核表达载体pQE-30Xa,转化大肠杆菌M15[PREP4],异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE可见与预期大小相符的蛋白条带,Western blotting证实该条带为重组入RXR-α蛋白,并用Ni2-NTA柱进行亲和层析纯化.免疫共沉淀结果显示其具有与TRβI结合的能力.电泳迁移率改变实验(EMSA)显示RXR-α与TRβ1形成的杂二聚体具有与DNA结合的能力.结果显示,文章已成功建立了重组人RXR-α的大肠杆菌表达系统,表达产物具有很好的生物学活性.