重金属铜离子单克隆抗体的制备及其间接竞争ELISA检测方法的建立

• 作者: 向军俭 唐勇 杨红宇 邹军辉 郭常伟
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 金属,重 铜 抗体,单克隆 酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 720-723
• 分类号: R392-33
• 语种: 中文

摘要

目的 制备重金属铜离子单克隆抗体,并建立间接竞争ELISA检测方法.方法 利用双功能螯合剂p-SCN-Bn-DTPA将Cu(Ⅱ)与载体蛋白BSA和OVA偶联,制备免疫抗原Cu(Ⅱ)-DTPA-BSA和检测抗原Cu(Ⅱ)-DTPA-OVA,免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合筛选稳定分泌抗重金属Cu(Ⅱ)-DTPA单克隆抗体的杂交瘤细胞株;制备腹水,测定抗体效价,鉴定抗体亚型,并检测其特异性;建立间接竞争ELISA检测方法,并与ICP-AES检测结果进行比较.结果 共筛选出3株稳定分泌抗重金属Cu(Ⅱ)-DTPA单克隆抗体的杂交瘤细胞,选择其中的4C2E7株制备腹水.腹水抗体效价为1×106,抗体亚类为IgG1,该抗体除与Co(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)和Hg(Ⅱ)存在17.5%、8.75%和1.46%的交叉反应外,与其他7种金属离子的交叉反应率均较低.该法最低检测限为2.0 ng/ml,与ICP-AES法检测结果的总符合率超过94%.结论 已成功制备了重金属铜离子单克隆抗体,并建立了间接竞争ELISA检测方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	向军俭	暨南大学抗体工程中心	121	1163	18.0	26.0
2	杨红宇	暨南大学抗体工程中心	37	394	13.0	18.0
3	唐勇	暨南大学抗体工程中心	84	866	17.0	23.0
4	郭常伟	暨南大学抗体工程中心	2	16	2.0	2.0
5	邹军辉	暨南大学抗体工程中心	1	11	1.0	1.0