斯氏艾美耳球虫MIC-5与兔IL-15基因在真核细胞中的共表达

• 作者: 乔军 孟庆玲 才学鹏 田广孚 闫鸿斌 骆学农
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 斯氏艾美耳球虫 MIC-5 兔IL-15 共表达
• 年，卷（期）: 2011,（19）
• 所属期刊栏目: 兽医
• 页码范围: 4096-4101
• 分类号: S852.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.19.021

摘要

[目的]构建能在真核细胞中共表达斯氏艾美耳球虫微线蛋白5(MIC-5)和兔IL-15重组载体,为进一步研究抗斯氏艾美耳球虫的免疫调节性DNA疫苗奠定基础.[方法]将斯氏艾美耳球虫MIC-5和兔IL-15基因,克隆到真核双表达载体pBudce4.1中,应用脂质体介导法将构建的重组质粒pB-MIC-5-IL-15转染BHK-21细胞.在转染后,用RT-PCR法和间接免疫荧光试验(IFA)分别检测MIC-5和IL-15基因在BHK-21细胞中的转录和表达情况.[结果]在重组质粒pB-MIC-5-IL-15转染BHK-21细胞24 h后即可检测到MIC-5、IL-15基因进行了转录；在转染36、48、72h后,MIC-5和IL-15基因可同时在BHK-21细胞中表达.[结论]成功构建了含有斯氏艾美耳球虫MIC-5和兔IL-15基因的重组载体,实现了两种基因在真核细胞中的共表达,为抗斯氏艾美耳球虫的免疫调节性DNA疫苗研制奠定了基础.