丝裂素蛋白激活激酶信号途径介导水杨酸钠诱导的人晶状体上皮细胞中HSP27表达

• 作者: 卢善华 李一壮 王智 田博 陈晖 高瑞莹
• 来源期刊: 中华实验眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 水杨酸钠 人晶状体上皮细胞 丝裂素蛋白激活激酶 热休克蛋白
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 412-417
• 分类号: R776.01
• 字数: 5896字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2011.05.007

摘要

背景 热休克蛋白(HSPs)是生物体在各种应激情况下产生的高度保守蛋白,HSP27与人晶状体中α-晶状体蛋白在氨基酸和基因水平上高度同源,其结构和表达的异常与白内障的形成密切相关.此研究先前的研究证实水杨酸钠对H2O2造成的人晶状体上皮细胞(LECs)损伤具有保护作用.目的 探讨水杨酸钠诱导的人LECs中HSP27的表达及与丝裂素蛋白激活激酶(MAPK)信号途径的关系.方法 人LECs.B3 系在含质量分数15%胎牛血清的DMEM中进行培养,将不同浓度的水杨酸钠(0～55 mmoL/L)加入培养基中刺激人LECs不同时间,然后去除刺激再分别培养.在阻断实验中,分别给予P38 MAPK、ERK1/2及JNK/SAPK信号通路特异性阻断剂SB20350(10 μmol/L)、PD98059(20 μmol/L)及SP600125(10 μmol/L)预孵育细胞1 h,在给予水杨酸钠刺激后检测相关指标,采用Western blot法检测各种处理情况下人LECs中HSP27的表达,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HSP27 mRNA的表达;免疫组织化学法检测HSP27蛋白在人LECs中的表达.结果正常人LECs仅有微弱的HSP27表达,35～55 mmoL/L水杨酸钠刺激人LECs 1 h去除刺激再培养6 h后可使HSP27表达显著增加,与正常对照组比较差异有统计学意义(F=509.953,P<0.01);55 mmol/L水杨酸钠刺激人LECs 1～5 h不能诱导HSP27的表达(F=2.119,P>0.05),而去除刺激再分别培养6 h后可诱导HSP27表达,差异有统计学意义(F=452.534,P<0.01);55 mmol/L水杨酸钠刺激人LECs 1 h后去除刺激再培养3 h后HSP27表达明显增加,6 h达到高峰,直至24 h恢复到基础水平,差异有统计学意义(F=419.234,P<0.01).水杨酸钠刺激30 min时磷酸化p38MAPK表达增加,1 h表达显著,各组总体差异有统计学意义(F=865.680,P<0.01);磷酸化ERK 1/2在水杨酸钠刺激时间内未见升高;去除水杨酸钠刺激再培养1 h后开始增加,6 h达到高峰,各时间点总体差异有统计学意义(F=388.840,P<0.01);水杨酸钠刺激1 h及去除刺激再培养过程中未见到磷酸化JNK的表达;加入P38MAPK、ERK1/2特异性阻断剂预处理人LECs 1 h后可使水杨酸钠诱导的HSP27表达受到显著抑制,加入JNK特异性阻断剂未见对水杨酸钠诱导的HSP27表达产生影响.结论水杨酸钠可诱导人LECs中HSP27的表达,P38MAPK和ERK1/2信号途径促进水杨酸钠诱导的HSP27在人LECs中的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王智	华中科技大学同济医学院附属协和医院眼科	26	159	7.0	11.0
2	田博	南方医科大学附属广东省人民医院眼科	3	4	1.0	2.0
3	高瑞莹	南京宁益眼科中心南京大学医学院附属鼓楼医院眼科	1	1	1.0	1.0
4	李一壮	南京宁益眼科中心南京大学医学院附属鼓楼医院眼科	2	2	1.0	1.0
5	陈晖	南京宁益眼科中心南京大学医学院附属鼓楼医院眼科	1	1	1.0	1.0
6	卢善华	南京宁益眼科中心南京大学医学院附属鼓楼医院眼科	1	1	1.0	1.0