反向PCR鉴定piggyBac介导的哺乳动物细胞转基因研究

• 作者: 王猛 郝碧芳
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: piggyBac 反向PCR 稳定表达 转基因 哺乳动物
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 141-143,152
• 分类号: Q812
• 字数: 2707字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2011.10.040

摘要

利用反向PCR技术,研究piggyBac介导的转基因哺乳动物中外源基因整合位点信息.首先在转座子piggyBac中插入巨细胞病毒(CMV)启动子元件驱动的绿色荧光蛋白基因(EGFP),构建用于转染哺乳动物细胞的转基因载体pXL - CMV - EGFP；同时构建以CMV启动子驱动的转座酶基因载体.将2种载体以脂质体共转染HEK293细胞,以单独的pXL-CMV-EGFP转染为阴性对照,结果表明,2个处理均观察到了绿色荧光蛋白的表达.通过反向PCR鉴定,在共转染转座酶的细胞基因组DNA中检测到外源基因的整合,而阴性对照中没有检测到,研究结果为进一步分析整合位点的信息及转基因检测提供了依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郝碧芳	江苏科技大学蚕业研究所	10	17	3.0	3.0
5	王猛	江苏科技大学蚕业研究所	6	16	3.0	3.0