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摘要:
目的 运用基因克隆技术构建带FLAG标签的腺苷酸激酶3(AK3)真核表达载体,观察其在哺乳动物细胞内的定位和表达情况.方法 以人AK3全长的cDNA序列的菌液为模板,设计带有FLAG标签的引物,用PCR方法构建出真核表达载体pcDNA3.1-AK3-FLAG.运用免疫荧光及Western blot法检测其在哺乳动物细胞中的定位与表达情况.结果 成功构建了pcDNA3.1-AK3-FLAG质粒;荧光定位试验表明AK3在COS7细胞的胞质中呈斑点状分布,细胞核中未见明显分布;Western blot法检测表明AK3在HEK-293T细胞中能有效表达.结论 AK3在哺乳动物细胞内能够有效表达和定位,为进一步研究AK3和其他蛋白之间的相互作用奠定了基础.
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内容分析
关键词云
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文献信息
篇名 人AK3基因在哺乳动物细胞系中的表达与定位
来源期刊 安徽医科大学学报 学科 医学
关键词 AK3 细胞定位 免疫荧光
年,卷(期) 2014,(11) 所属期刊栏目 基础医学研究
研究方向 页码范围 1531-1534
页数 4页 分类号 R341|R394.2
字数 2623字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 范礼斌 安徽医科大学生命科学学院生物学教研室 53 174 8.0 9.0
2 刘晓颖 安徽医科大学生命科学学院生物学教研室 57 121 6.0 8.0
3 李克娟 安徽医科大学生命科学学院生物学教研室 3 10 1.0 3.0
4 顾彧 安徽医科大学生命科学学院生物学教研室 2 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
节点文献
AK3
细胞定位
免疫荧光
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
安徽医科大学学报
月刊
1000-1492
34-1065/R
大16开
合肥市梅山路安徽医科大学校内
26-36
1955
chi
出版文献量(篇)
7450
总下载数(次)
15
总被引数(次)
37040
相关基金
安徽省自然科学基金
英文译名:Anhui Provincial Natural Science Foundation
官方网址:http://www.ahinfo.gov.cn/zrkxjj/index.htm
项目类型:安徽省优秀青年科技基金
学科类型:
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