稳定表达TAT融合蛋白的哺乳动物细胞系的建立

• 作者: 张强 朱武洋 李晓峰 秦成峰 秦鄂德 赵慧 陈水平
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白转导 融合蛋白质类,TAT 细胞系
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1031-1033
• 页数: 3页
• 分类号: R329.2
• 字数: 3710字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2007.10.009

摘要

目的 建立能够稳定分泌表达TAT融合蛋白的哺乳动物细胞系.方法 依次将合成的编码TAT蛋白转导域和EGFP的DNA片段插入分泌型真核表达载体pSecTag2A,构建编码TAT-EGFP融合蛋白的重组质粒,转染Vero细胞后,经Zeocin筛选建系,通过荧光显微镜和免疫印迹鉴定表达的蛋白,MTT分析细胞毒性,荧光观察蛋白转导活性.结果 成功获得了稳定分泌表达TAT-EGFP融合蛋白的工程细胞系,表达的TAT融合蛋白具有良好的蛋白转导活性.结论 建立的哺乳动物细胞表达系统能够持续产生具有蛋白转导活性的TAT融合蛋白,为相关应用研究奠定了基础.