猪附红细胞体MSG1基因人工合成、克隆、表达及免疫原性分析

• 作者: 刘建柱 刘永夏 刘海涛 周栋 张利 成子强 柴同杰 王振勇 王淑静 陈甜甜
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 猪附红细胞体 粘附蛋白MSG1 ELISA
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 页码范围: 254-256
• 分类号: R382
• 字数: 2647字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2011.03.019

摘要

目的 利用引物重叠扩增法人工合成猪附红细胞体粘附蛋白基因MSG1,并检测其免疫原性.方法 将人工合成的猪附红细胞体粘附蛋白基因MSG1产物插入到pMD18-T载体中,亚克隆至原核表达载体pET28c,构建pET28c_msg1表达载体,转入E.coli BL21,IPTG诱导表达.用SDS-PAGE,Western-blot方法分析鉴定,表达产物具有很好的抗原性.纯化后的重组蛋白接种昆明小白鼠后,用重组蛋白作为抗原包被酶标板,以检测接种昆明小白鼠血清抗体的产生.结果 结果表明MSG1基因在大肠杆菌中能够得到高效的表达,并能够刺激小鼠产生较好的抗体.结论 人工成功的合成了猪附红细胞体粘附蛋白基因MSG1,其基因可在大肠杆菌中高效表达,并可刺激小鼠产生较好的抗体.