芒果尖孢炭疽病病原茵的绿色荧光蛋白基因标记

• 作者: 刘晓妹 吕延超 张俊 张欣 张贺 蒲金基
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 芒果炭疽病 尖孢炭疽菌 绿色荧光蛋白基因 转化
• 年，卷（期）: 2011,（9）
• 所属期刊栏目: 生物技术与组织培养
• 页码范围: 1708-1710
• 分类号: S667.7
• 字数: 3038字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2011.09.025

摘要

芒果炭疽病是世界性的主要病害之一,引起芒果炭疽病的病原菌有胶孢炭疽菌和尖孢炭疽菌2种.通过溶壁酶酶解菌丝体成功制备尖孢炭疽菌原生质体,用抗潮霉素基因作为选择标记,采用PEG介导的原生质体转化法,用绿色荧光蛋白表达载体(pCT74-sGFP)转化原生质体,获得表达GFP尖孢炭疽菌的转化子菌株；转化子菌株在含潮霉素平板上经多次单孢纯化后,在无选择压下连续继代培养仍能发出稳定而强烈的绿色荧光,用GFP特异性引物PCR扩增转化子菌株基因组DNA获得预期大小片段,表明gfp基因已成功导入芒果炭疽病病原 菌基因组中,且稳定遗传；GFP标记菌株生长正常,致病性和野生型菌株无明显差别,这为进一步研究该病菌在自然界的生物学及侵染方式奠定了基础.