建立环介导间接PCR同时检测3种主要猪源性病毒

• 作者: 王老七 边传周 郑鸣
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒2型 猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 环介导间接PCR
• 年，卷（期）: 2011,（21）
• 所属期刊栏目: 兽医
• 页码范围: 4499-4507
• 分类号: S858.28
• 语种: 中文

摘要

[目的]建立同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV]的环介导间接PCR方法,实现3种病毒快速检测.[方法]根据GenBank数据库中猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CsFv)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的核苷酸序列设计3对特异性探针,利用PCR技术分别标记于大豆Lectin基因片段的两端形成3种不同的报告基因,此标记的报告基因与3种待测靶标基因经杂交、缺口补平、环化后,采用1对引物反向PCR扩增报告基因,建立了PCV2、CSFV和PRRSV的环介导间接PCR检测方法,扩增片段大小分别为564 bp、434 bp和338 bp,该方法即可用于单病毒检测又可用于多病毒检测.[结果]灵敏度和特异性试验结果表明,无论是单病毒检测还是多病毒检测,该法都具有高度特异性,与其它病原检测无明显交叉反应；对PCV2.CSFV和PRRSV 3种病毒同时检测的底限分别为0.8、25和6.2 pg.μL-1,和单个病毒的检测灵敏度相同.利用环介导间接PCR和常规PCR对20份临床样本进行比较检测,结果表明,无论单病毒检测还是多病毒检测,其结果均与常规PCR检测结果完全一致.[结论]环介导间接PCR检测技术可用于PCV2、CSFV和PRRSV 3种病毒的同时检测,是一种简便快速、灵敏、特异的病原学诊断工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	边传周	郑州牧业工程高等专科学校生物技术实验室	99	551	13.0	19.0
2	郑鸣	郑州牧业工程高等专科学校生物技术实验室	25	171	9.0	12.0
3	王老七	郑州牧业工程高等专科学校生物技术实验室	30	211	7.0	13.0