分级提取蛋白技术在蛋白质组学中的应用

• 作者: 王维君
• 来源期刊: 农产品加工．学刊
• 学科: 生物学
• 关键词: 蛋白质组学 蛋白质提取 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
• 年，卷（期）: ncpjgx_2011,（8）
• 页码范围: 44-48
• 页数: 5页
• 分类号: Q816

摘要

以小鼠急性肝脏氧化损伤为模型,通过采用不同浓度的丙酮对小鼠肝脏蛋白进行分级提取和沉淀,用SDS-聚丙烯酰胺连续密度梯度凝胶电泳（SDS-PAGE）试验寻找差异表达蛋白质。通过试验发现,模型组中水溶性总蛋白、非水溶性总蛋白和膜蛋白总体表达量较空白组均有明显降低,进而对水溶性总蛋白进行的分级提取试验中发现有2个蛋白条带具有显著的差异性。进一步以基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）检测差异蛋白的肽质量指纹,在蛋白质数据库中检索鉴定差异蛋白的种类,经鉴定两种差异蛋白分别为一种未命名蛋白和Cu/Zn超氧化物歧化酶（Cu/Zn superoxide dismutase）,为进一步研究其损伤机理奠定基础。通过分级提取蛋白质样品的试验方法,降低了蛋白组学当中蛋白质分离的成本和技术难度,在保证蛋白纯度的同时提高了电泳的分辨率,电泳图中的条带清晰、分明,便于后期进行质谱分析,同时也为蛋白质组学的应用提供了一种新思路和新方法。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王维君	天津市食品加工工程中心天津科技大学	4	5	1.0	2.0