橡胶树细胞悬浮系电激转化体系的初步研究

• 作者: 安泽伟 祝建顺 程汉 肖成江 黄华孙
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 橡胶树 细胞悬浮系 均匀设计 偏最小二乘同归
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 生物技术应用及组织培养
• 页码范围: 245-250
• 分类号: S794.1
• 字数: 5093字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2011.02.012

摘要

以橡胶树属种间杂交系Bl(H.brasiliensis×H.nitida)的细胞悬浮系为试材,采用均匀设计结合偏最小二乘(PLS)同归,以瞬时表达率(Y1)、细胞成活率(Y2)为试验指标综合评价,以因变量最大值为优化方向,同时对两个试验指标进行同归建模.实验结果表明,正常接种后培养3 d对数期的悬浮细胞,在10μF、2kn、1 300 V/cm的电激条件下,蔗糖浓度为0.4 mol/L的电激转化液,加入终浓度为90μg/mL的线性质粒CaMV35S-EGFP-NOS,600 mbar压强下抽真空1 min,可使细胞瞬时表达率达到0.648 1%,成活率达到56.9847%.通过对电激转移中相关因素的优化,建立了一种适用于橡胶树悬浮细胞系较稳定的电激转移体系,为橡胶树悬浮细胞系转基因的研究提供有效方法.