玉米大斑病菌REMI体系的建立及突变体分析

• 作者: 刘丽华 吴敏 李坡 牛安莉 董金皋 谷守芹
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 玉米大斑病菌 REMI 原生质体 转化
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 716-722
• 分类号: S435.131
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.04.008

摘要

[目的]建立高效的玉米大斑病菌REMI遗传转化体系,进而利用该技术创制突变体,为克隆病菌生长发育和致病性相关的基因莫定基础.[方法]摸索玉米大斑病菌原生质体制备的菌龄、酶系统及酶解条件、原生质体收集方式、转化子最适潮霉素B筛选浓度以及转化使用的质粒,建立该病菌高效的REMI转化体系;利用PCR技术对潮霉素B抗性转化子进行筛选并对部分突变体进行分析.[结果]培养20 h的幼嫩菌丝,用浓度分别达到1.25%的Lyallzyme,Snailase和Drislase 3种酶混和液酶解4h、离心速度为3 000 r/min时原生质体产量最大;当潮霉素B浓度为50 μg·mL(-1)时,野生型菌株的分生孢子萌发和菌落生长完全受到抑制,可选用该浓度作为转化子的筛选浓度;使用pAN7-1转化效率较高,对利用该体系转化获得的大量转化子进行PCR检测中筛选出了部分产孢量和致病力变化的突变菌株.[结论]建立了玉米大斑病菌的REMI遗传转化体系,将为玉米大斑病菌突变体库的建立和致病相关基因的克隆奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董金皋	河北农业大学生命科学学院植物分子病理学实验室	210	2521	27.0	39.0
2	谷守芹	河北农业大学生命科学学院植物分子病理学实验室	22	236	9.0	15.0
3	刘丽华	河北农业大学生命科学学院植物分子病理学实验室	16	141	7.0	11.0
4	李坡	河北农业大学生命科学学院植物分子病理学实验室	5	80	4.0	5.0
5	吴敏	河北农业大学生命科学学院植物分子病理学实验室	6	44	4.0	6.0
6	牛安莉	河北农业大学生命科学学院植物分子病理学实验室	1	3	1.0	1.0