垂体腺苷酸环化酶激活多肽38及其衍生物的表达、纯化和活性

• 作者: 吴自荣 张洪丹 王小溪 肖磊 赵丽芬 黄静
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 垂体腺苷酸环化酶激活多肽 饮食抑制 长期给药 葡糖耐量试验
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 526-530
• 分类号: Q555|R392-33
• 语种: 中文

摘要

目的 提高垂体腺苷酸环化酶激活多肽38(Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide 38,PACAP38)的体内稳定性、延长其生物学活性.方法 对PACAP38的氨基酸序列进行改造(命名为PACAP38衍生物cPACAP38),并根据大肠杆菌密码偏爱性设计并合成PACAP38及其衍生物的基因片段;分别将两基因片段克隆至表达载体pET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达;表达的融合蛋白经镍离子亲和层析纯化,肠激酶切割获得目的 多肽;通过小鼠饮食抑制试验比较两多肽的体内活性;长期给药观察小鼠腹腔糖耐量及小鼠血清甘油三酯、HDL、LDL和胆固醇的变化.结果 两种融合蛋白Trx-PACAP38和Trx-cPACAP38的表达量分别占菌体总蛋白的22%和25%,为可溶性表达,纯化后纯度分别为90%和98%;PACAP38及cPACAP38均有抑制小鼠饮食的作用,cPACAP-38的效果优于PACAP38;连续给药10 d后,小鼠腹腔糖耐量、血清甘油三酯、HDL、LDL、胆周醇均无明显变化.结论 已成功获得体内活性更稳定的PACAP38衍生物,为PACAP38的基础研究及应用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴自荣	华东师范大学生命科学学院	75	928	14.0	27.0
2	黄静	华东师范大学生命科学学院	63	532	10.0	21.0
3	肖磊	华东师范大学生命科学学院	4	10	2.0	3.0
4	赵丽芬	华东师范大学生命科学学院	3	10	2.0	3.0
5	张洪丹	华东师范大学生命科学学院	4	6	2.0	2.0
6	王小溪	华东师范大学生命科学学院	3	2	1.0	1.0