流感病毒H3N2血凝素基因和神经氨酸酶基因在大肠杆菌中的表达

• 作者: 于在江 唐启慧 张烨 舒跃龙 辛丽 陈永坤 陈禹保 黄捷勤
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 医学
• 关键词: 流感病毒H3N2 血凝素 神经氨酸酶 克隆表达
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 213-218
• 分类号: R5
• 字数: 5131字
• 语种: 中文

摘要

克隆、表达和鉴定流感病毒H3N2 HA,NA基因序列,为制备抗体和基因工程疫苗打下基础.在成功克隆流感病毒H3 N2全长HA,NA基因并测序的基础上,将部分基因序列克隆到表达载体pET32a(+)上,全基因序列克隆到表达载体pGEX4T-1上,构建了重组表达质粒pET32a(+)/HA(截短),pET32a(+)/NA(截短),pGEX4T-1/HA,转化大肠杆菌BL21/Rosetta, IPTG诱导表达,利用Ni2+亲和层析柱和GSTrap 4B亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,并用Western blotting和ELISA方法检测其抗原性.结果显示,重组蛋白在大肠杆菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示其相对分子质量与预计大小一致.ELISA和Western blotting试验证实,重组蛋白具有良好的抗原性.成功克隆和表达了流感病毒H3N2 HA、NA基因序列,可为流感病毒H3N2诊断试剂和疫苗的开发等进一步的研究提供参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张烨	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	23	109	7.0	9.0
2	于在江	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	12	13	2.0	3.0
3	辛丽	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	12	25	3.0	4.0
4	陈永坤	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	9	13	2.0	3.0
5	唐启慧		7	19	3.0	4.0
6	陈禹保		6	18	3.0	4.0
7	黄捷勤		2	2	1.0	1.0