禽流感病毒H7N2血凝素HA1基因在大肠杆菌中的表达

• 作者: 冉多良 多海刚 孙明 王传彬 王宏伟 田克恭 赵铁柱 陈西钊
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 医学
• 关键词: H7N2亚型禽流感病毒 HA1基因 表达
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 专论(二)
• 页码范围: 7-10
• 页数: 4页
• 分类号: R373.1
• 字数: 2681字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2005.01.002

摘要

目的表达H7N2亚型禽流感病毒(AIV)HA1基因,用于感染H7亚型禽流感病毒抗体的检测和HA1蛋白功能研究.方法采用RT-PCR方法对H7N2亚型AIV HA1基因进行扩增,将PCR产物克隆于pGEM-T-Easy载体,将该基因插入pGEX-4T-2中构建HA1基因原核表达载体, 转化BL21大肠杆菌后,在IPTG诱导下表达HA1蛋白,Western blot鉴定表达HA1蛋白.电洗脱方法纯化表达HA1蛋白,建立间接ELISA方法,对感染AIV H7、H9、H5亚型AIV阳性血清进行检测.结果成功克隆H7N2亚型AIV的HA1基因,其核苷酸序列长度966bp,编码322个氨基酸残基.构建HA1基因原核表达载体在大肠杆菌内表达出约61×103的HA1融合蛋白.Western blot和ELISA方法鉴定表明:表达HA1蛋白与感染H7亚型 AIV鸡血清有反应,与H5、H9亚型AIV阳性血清没有反应.结论本研究在大肠杆菌中成功表达了H7N2亚型AIV HA1基因蛋白,具有与感染H7亚型AIV阳性血清反应原性,不与H5和H9亚型AIV 感染阳性血清发生反应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵铁柱		12	64	5.0	7.0
2	孙明		19	131	7.0	10.0
3	陈西钊		22	220	8.0	14.0
4	田克恭		43	453	11.0	19.0
5	冉多良		125	564	11.0	18.0
6	王传彬		18	271	8.0	16.0
7	王宏伟		13	131	7.0	11.0
8	多海刚		1	5	1.0	1.0