LIM结构域蛋白FHL1C抑制Notch信号途径的转录激活研究

• 作者: 严学倩 于恒超 付伟 梁英民 秦鸿雁 韩骅
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: FHL1C 急性T淋巴细胞白血病 慢病毒 Notch信号途径
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 657-661
• 分类号: R373|Q75|Q78
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆人表达FHL1C基因以及建立真核表达栽体和慢病毒栽体.方法:从人的骨骼肌细胞来源的cDNA中扩增并克隆人FHL1C基因的编码区,连接至pMD-18T载体酶切鉴定后测序.序列测定确认后,双酶切pMD18T-FHL1C回收片段,插入真核表达载体,构建真核表达栽体pCMV-Myc-FHL1C酶切鉴定正确后,转染Hela细胞及Cos7细胞,用Western Blot检测其在转染细胞中的表达,用双荧光素报告基因系统检测其对Notch信号作用.构建FHL1C-IRES-GFP表达单元,建立慢病毒表达载体plenti6/V5-FHL1C-IRES-GFP,包装慢病毒后感染培养的细胞,用免疫荧光显微镜、Western Blot检测分析其在被感染的细胞中的表达.结果:通过PCR方法成功扩增了人FHL1C基因的编码区.通过转染Hela及Cos7细胞,使用Western Blot检测其蛋白水平表达,双荧光报告基因系统分析均能够下调激活的Notch信号.成功构建了FHL1C慢病毒表达栽体pLenti6/V5-FHL1C-IRES-GFP,包装慢病毒,把获取的慢病毒感染细胞后通过荧光显微镜证实被感染的细胞绿色荧光蛋白正确表达,Western Blot检测证实其表达.结论:成功建立起FHL1C真核表达载体及慢病毒表达系统,为研究急性T淋巴细胞白血病与Notch信号转导通路之间的关系奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩骅	第四军医大学基础部遗传与发育教研室	118	472	11.0	13.0
2	秦鸿雁	第四军医大学基础部遗传与发育教研室	42	148	7.0	9.0
3	梁英民	第四军医大学唐都医院血液内科	68	191	8.0	11.0
4	于恒超	第四军医大学基础部遗传与发育教研室	11	56	3.0	7.0
5	付伟	第四军医大学唐都医院血液内科	5	10	2.0	3.0
6	严学倩	第四军医大学唐都医院血液内科	6	11	2.0	3.0