LIM结构域蛋白FHL1C与GNB2不存在相互作用

• 作者: 刘娟 张丙芳 王媛媛 秦鸿雁 赵俊龙 韩骅
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: LIM结构域 FHL1C GNB2 哺乳动物双杂交 免疫共沉淀
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1068-1073
• 页数: 6页
• 分类号: R
• 字数: 3642字
• 语种: 中文
• DOI: 11.13753/j.issn.1007-6611.2015.11.005

摘要

目的 通过哺乳动物双杂交及免疫共沉淀技术验证经质谱技术获得的LIM结构域蛋白FHL1C相互作用候选分子GNB2与FHL1C之间是否存在相互作用,从而丰富FHL1C调控Notch信号通路的机制. 方法 分别构建融合质粒pCMV-GAL4-DBD-FHL1C和pCMV-VP16-GNB2,并将其共转染HeLa细胞,通过哺乳动物双杂交实验验证两者在细胞内是否具有相互作用;构建带Flag标签的GNB2融合蛋白的重组载体pCMV-Flag-GNB2,酶切鉴定正确后,与带myc标签的FHL1C融合蛋白的重组真核表达载体pCMV-myc-FHL1C共转染HeLa细胞,利用免疫共沉淀技术检测GNB2与FHL1C之间是否存在生理上的相互作用. 结果 哺乳动物双杂交实验和免疫共沉淀实验均显示:FHL1C与GNB2之间不存在生理上的相互作用. 结论 成功构建了实验所需的GNB2的融合蛋白真核表达重组载体,利用哺乳动物双杂交实验及免疫共沉淀技术证实FHL1C与GNB2之间不存在相互作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩骅		118	472	11.0	13.0
2	秦鸿雁		42	148	7.0	9.0
3	刘娟	第四军医大学西京医院老年病科	46	192	7.0	11.0
4	张丙芳	第四军医大学西京医院老年病科	58	318	9.0	15.0
5	赵俊龙		4	20	2.0	4.0
6	王媛媛		8	109	5.0	8.0