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摘要:
目的:利用酵母双杂交技术筛选FHL2的相互作用蛋白,为进一步研究FHL2的功能奠定基础.方法:从卵巢文库中钓取FHL2 cDNA,构建诱饵蛋白载体pAS2-1-FHL2,利用酵母双杂交筛选技术,在卵巢文库中筛选与FHL2相互作用的蛋白.将含有pACT2-候选基因的酵母菌与含有pAS2-1-FHL2的酵母菌进行交配实验,利用LacZ报告基因检测FHL2与候选蛋白之间是否存在相互作用.将FHL2和候选蛋白分别构建到pGEX-KG和pET-28a上,并纯化GST-FHL2和His-候选蛋白融合蛋白,利用GST沉淀实验进一步验证FHL2和候选蛋白的体外相互作用.结果:所获取的候选蛋白为IGFBP-7,是胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBPs)家族中的一员.交配实验表明,IGFBP-7与FHL2能特异性地相互作用,而不与空载体或BRCT1对照相互作用.GST沉淀实验进一步验证,IGFBP-7能与FHL2结合,而不与GST结合.结论:FHL2和IGFBP-7在体内及体外均可发生特异性的相互作用.
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文献信息
篇名 FHL2与IGFBP-7存在直接相互作用
来源期刊 军事医学科学院院刊 学科 生物学
关键词 FHL2 IGFBP-7 相互作用 GST沉淀 酵母双杂交
年,卷(期) 2005,(4) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 305-308,336
页数 5页 分类号 Q753
字数 4274字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1674-9960.2005.04.002
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 黄翠芬 军事医学科学院生物工程研究所 113 787 15.0 23.0
2 王晓辉 军事医学科学院生物工程研究所 9 30 3.0 5.0
3 叶棋浓 军事医学科学院生物工程研究所 138 519 11.0 17.0
4 方言 军事医学科学院生物工程研究所 12 30 4.0 5.0
5 丁丽华 军事医学科学院生物工程研究所 47 135 6.0 8.0
6 焦园园 军事医学科学院生物工程研究所 3 34 2.0 3.0
7 周蕾 军事医学科学院生物工程研究所 28 247 8.0 15.0
8 刘雨飞 军事医学科学院生物工程研究所 5 16 2.0 3.0
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FHL2
IGFBP-7
相互作用
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酵母双杂交
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