农杆菌介导的CMV侵染性克隆及2b缺失突变体构建

• 作者: 姚敏 张天奇 王源超 田志超 陶小荣
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 黄瓜花叶病毒 侵染性克隆 农杆菌浸润 2b缺失突变体
• 年，卷（期）: 2011,（14）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 3060-3068
• 分类号: S432.41
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.14.024

摘要

[目的]构建农杆菌介导的黄瓜花叶病毒(CMV)侵染性克隆,测试缺失CMV 2b基因后的侵染表型.[方法]首先将pHST40上的1×35S-MCS-HDVRZ-NOS转移到中间载体pBluescript SK Ⅱ上,用pRTL2上的2×35S替换中间载体上的1×35S增强子序列,然后将2x35S-MCS-HDVRZ-NOS转移到微型植物表达载体pCB301,构建适用于病毒侵染性克隆和农杆菌浸润的植物表达载体,在此基础上将CMV Fny株系的全长cDNA基因组构建到该植物表达载体的2x35S启动子和HDV核酶之间,通过农杆菌浸润在本氏烟中瞬时表达产生具有侵染活性的CMV基因组RNA,进一步缺失2b来测试该缺失突变体侵染植物的表型.[结果]构建了一个用于构建RNA病毒侵染性克隆的植物表达载体pCB301-2×35S-MCS-HDVRZ-NOS,将CMV Fny的3条基因组分别构建在这个植物表达载体上后,通过农杆菌浸润本氏烟可诱导产生曲叶,花叶和矮化等症状,进一步对2b进行缺失,表明该缺失突变体接种本氏烟早期具有微弱曲叶症状,中后期表现无症,RT-PCR检测表明CMV Fny 2b缺失突变体能够系统侵染本氏烟.[结论]在改造的微型植物表达载体pCB301-2×35S-MCS-HDVRZ-NOS上构建了CMV的侵染性克隆,构建的侵染性克隆通过农杆菌介导可快速高效侵染植物.2b对CMV Fny在本氏烟中的症状发展具有重要作用,但2b对其在本氏烟上的复制和系统侵染并不是必需.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王源超	南京农业大学植物保护学院	62	1051	19.0	30.0
2	姚敏	南京农业大学植物保护学院	4	38	3.0	4.0
3	张天奇	南京农业大学植物保护学院	1	20	1.0	1.0
4	田志超	南京农业大学植物保护学院	1	20	1.0	1.0
5	陶小荣	南京农业大学植物保护学院	3	27	2.0	3.0