盐酸多西环素对重组质粒pBI-EGFP-hHO-1表达的调控

• 作者: 单杰 张新胜 张海风 杨婧 王媛 赵勤
• 来源期刊: 中国老年学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血色素氧化酶-1 Tet-off诱导表达系统 盐酸多西环索
• 年，卷（期）: 2011,（21）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 4193-4196
• 分类号: R393
• 字数: 3831字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9202.2011.21.047

摘要

目的 构建Tet-off调控的血色素氧化酶-1(HO-1)真核表达载体pBI-EGFP-hHO-1,并确定盐酸多西环素对其表达的调控剂量.方法 利用分子生物学技术,将hHO-1基因与质粒pBI-EGFP连接构成重组质粒.NheI和MluI双酶切鉴定后采用RT-PCR技术及免疫细胞化学的方法检测其在人肝癌细胞SMMC-7721中的表达情况.利用RT-PCR技术检测Tet-off和pBI-EGFP-hHO-1双转染后不同浓度盐酸多西环素对hHO-1基因mRNA表达量的影响,确定该四环素调控系统的盐酸多西环素诱导量.结果 用NheI和MluI双酶切证明hHO-1成功克隆入应答质粒pBI-EGFP；RT-PCR、免疫细胞化学检测结果表明重组质粒在SMMC-7721细胞中表达；经RT-PCR检测显示当盐酸多西环素浓度≥2000 ng/ml时,HO-1基因mRNA表达降低,与未转染组接近.结论 成功构建了由Tet-off调控的真核表达载体pBI-EGFP-hHO-1,并确定盐酸多西环素对其调控剂量为2 000 ng/ml.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵勤	郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	22	152	7.0	12.0
2	单杰	郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	18	70	6.0	7.0
3	张海风	郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	14	43	4.0	6.0
4	张新胜	郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	6	39	3.0	6.0
5	王媛	郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	28	52	5.0	6.0
6	杨婧	郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	4	6	1.0	2.0