靶向Slug基因的腺相关腺病毒载体的构建及其抑制胃癌细胞BGC-823生长的体外研究

• 作者: 崔海宁 贾德俊
• 来源期刊: 中国医学创新
• 学科: 医学
• 关键词: Slug基因 干扰 腺相关腺病毒 胃癌肿瘤 增殖 血管生成
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 18-20
• 分类号: R73
• 字数: 4222字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-4985.2011.01.009

摘要

目的 构建携带目的基因的rAAV-EGFP-Slug-siRNA载体.方法 构建pDC316-EGFP-Slug-siRNA质粒,扩增和回收EGFP-Slug-siRNA片段;酶切pSNAV2.0-lacz-α载体质粒,并与上述产物进行连接;转化感受态大肠杆菌DH5α,得到pSNAV2.0-EGFP-Slug-siRNA,酶切和测序对其进行鉴定.制备rAAV2-EGFP-Slug-siRAN并对其纯化、鉴定和滴度测定.将BGC-823转染rAAV-EGFP-Slug-siRNA和pSNAV2.0-EGFP;鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)试验检测血管生成,MTT比色法检测细胞存活率.结果 质粒pSNAV2.0-EGFP-Slug-siRNA,经PCR、酶切和测序鉴定,质粒构建正确.将构建成功的载体质粒与HSV1-rc/UL2共转染包装细胞BHK-2,成功复制和包装出rAAV2-EGFP-Slug-siRNA,经检测目的片段插入成功.Slug-siRNA有效抑制BGC-823细胞内Slug表达后,肿瘤血管生成被抑制,细胞存活率明显降低.结论 成功制备出高滴度的携带目的基因的rAAV-EGFP-Slug-siRNA病毒载体.干扰Slug可抑制肿瘤血管生成,抑制胃癌细胞BGC-823的生长增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔海宁	海南医学院附属医院	40	162	8.0	10.0
2	贾德俊		2	2	1.0	1.0