苜蓿叶绿体DNA的提取及其Rbcl基因片段的克隆

• 作者: 刘秀明 朱海林 李巍 李校堃 李海燕 杜美丽 江莺
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 苜蓿 叶绿体DNA 提取 Rbcl基因 克隆
• 年，卷（期）: 2011,（22）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 13306-13308
• 分类号: S188
• 字数: 3254字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2011.22.020

摘要

[目的]获得高纯度的苜蓿叶绿体DNA(cpDNA)和Rbcl基因片段.[方法]采用改进的高盐低pH法分离和纯化苜蓿叶绿体DNA；利用叶绿体基因组进化中高度保守的特点,设计引物,从苜蓿叶绿体基因组中扩增Rbcl基因,利用生物学软件对测序结果进行分析.[结果]经检测分析,获得了产率较高和纯度较好的苜蓿叶绿体DNA,并用PCR方法扩增获得了1130 bp的Rbcl基因片段.该基因片段有17个常用的限制性内切酶酶切位点,与烟草、水稻、菜豆、玉米、甘薯和甜菜中Rbcl基因核苷酸的同源性为85.6％～90.6％.[结论]为构建苜蓿叶绿体表达载体和通过叶绿体生物反应器生产药用蛋白等奠定了基础.